# 크롬의 생물학적 노출지표 물질 분석에 관한 기술지침

> **출처**: 한국산업안전보건공단 (KOSHA)
> **지침번호**: H-141-2021
> **원본 URL**: https://portal.kosha.or.kr/openapi/v1/file/down/FL00015883748/6
> **License**: 공공누리 출처표시 (변경금지)
> **추출 방식**: PDF → kordoc (라텔웍스 자체 도구, HTML 표 보존)
> **주의**: 이미지·일부 시각적 서식 손실 가능. 정확 원본은 위 URL.

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<tr><th colspan="4"></th></tr>
<tr><td rowspan="5"></td><td>KOSHA GUIDE</td><td colspan="2" rowspan="3"></td></tr>
<tr><td>H - 141 - 2021</td></tr>
<tr><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td colspan="2">크롬의 생물학적 노출지표 물질 분석에 관한기술지침</td><td rowspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">2021.10.<br>한국산업안전보건공단</td></tr>
</table>

안전보건기술지침의 개요
ㅇ 제정자 : 한국산업안전보건공단 산업안전보건연구원 최윤정
ㅇ 개정자 : 한국산업안전보건공단 산업안전보건연구원 이미영
ㅇ 제정 경과
- 2013년 6월 KOSHA GUIDE 산업위생분야 제정위원회 심의(제정)
- 2019년 11월 KOSHA GUIDE 산업의학분야 제정위원회 심의(개정)
- 2021년 8월 산업의학분야 표준제정위원회 심의(법령 및 규격 최신화)
ㅇ 관련규격 및 자료
- 한국산업안전보건공단 산업안전보건연구원. 근로자 건강진단 실무지침: 제1권 특
수건강진단의 개요. 2020-산업안전보건연구원-349
- 한국산업안전보건공단 산업안전보건연구원. 생물학적 노출평가 기준 및 분석방법
연구 III: 납 등 중금속 10종. 보건분야-연구자료 연구원 2010-66-882. 2010
ㅇ 관련법규․규칙․고시 등
- 산업안전보건법 시행규칙 [별표 24] 특수건강진단ㆍ배치전건강진단ㆍ수시건강진단
의 검사항목(제206조 관련)
- 고용노동부고시 제2020-61호(특수건강진단기관의 정도관리에 관한 고시)
- 고용노동부고시 제2020-60호(근로자 건강진단 실시기준)
- 한국산업안전보건공단 산업안전보건연구원.「근로자건강진단 실무지침」제1권 특수
건강진단 개요. 2020-산업안전보건연구원-349
ㅇ 기술지침의 적용 및 문의 이 기술지침에 대한 의견 또는 문의는 한국산업안전보건공단 홈페이지 (http://kosha.or.kr) 안전보건기술지침 소관 분야별 문의처 안내를 참고하시기 바랍니다.
공표일자 : 2021년 10월 제정자 : 한국산업안전보건공단 이사장

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## 크롬의 생물학적 노출지표 물질 분석에 관한 기술지침

1. 목 적
이 지침은 산업안전보건법(이하 “법”이라고 한다) 제130조(특수건강진단) 및 같은 법

시행규칙(이하 “시행규칙”이라고 한다) 제206조(특수건강진단 등의 검사항목 및 실

시방법 등) 별표 24, 고용노동부고시 제2020-61호(특수건강진단기관의 정도관리에

관한 고시) 및 고용노동부고시 제2020-60호(근로자 건강진단 실시기준)에 따라 크롬

에 노출된 근로자의 생물학적 노출평가와 관련된 생물학적 노출지표 물질의 분석 방

법의 제시를 목적으로 한다.

2. 적용범위
이 지침은 법, 시행규칙 및 고용노동부고시에 따라 실시하는 근로자 건강진단 중 크

롬에 노출되는 근로자의 생물학적 노출평가에 적용한다.

3. 정 의
(1) 이 지침에서 사용하는 용어의 뜻은 다음과 같다.

(가) “생물학적 노출평가”란 혈액, 소변 등 생체시료 중 유해물질 자체 또는 유해물

질의 대사산물이나 생화학적 변화산물 분석값을 이용한, 유해물질 노출에 의한

체내 흡수정도 또는 건강영향 가능성 등의 평가를 의미한다.

(나) “생물학적 노출지표 물질”이란 생물학적 노출평가를 실시함에 있어 생체 흡수

정도를 반영하는 물질로서 유해물질 자체나 그 대사산물, 생화학적 변화물 등

을 말한다.

(다) “생물학적 노출기준값”이란 일주일에 40시간 작업하는 근로자가 고용노동부고

시에서 제시하는 작업환경 노출기준 정도의 수준에 노출될 때 혈액 및 소변

중에서 검출되는 생물학적 노출지표물질의 값이다.

(라) “정밀도(Precision)”란 일정한 물질에 대하여 반복측정․분석을 했을 때 나타나

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는 자료분석치의 변동의 크기를 나타낸다. 이 경우 같은 조건에서 측정했을 때

일어나는 우연오차(Random error)에 의한 분산(Dispersion)의 정도를 측정값의

변이계수(Coefficient of variation)로 표시한다.

(마) “정확도(Accuracy)”란 분석치가 참값에 접근한 정도를 의미한다. 다만, 인증표

준물질이 있는 경우는 상대오차로 표시하고, 인증표준물질이 없는 경우는 시

료에 첨가한 값으로부터 구한 평균회수율로 표시한다.

(바) “검출한계(Limit of detection: LOD)”란 공시료 신호값(Blank signal, background

signal)과 통계적으로 유의하게 다른 신호값(Signal)을 나타낼 수 있는 최소의

농도를 의미한다. 이 경우 가장 널리 사용하는 공시료 신호값과의 차이가 공

시료 신호값 표준편차의 3배인 경우로 한다.

(2) 그밖에 용어의 뜻은 이 지침에서 특별히 규정하는 경우를 제외하고는 법, 같은

법 시행령, 같은 법 시행규칙 및 「산업보건기준에 관한 규칙」에서 정하는 바에

따른다.

4. 분석개요
소변 중 크롬을 분석하며, 분석장비는 비불꽃 원자흡광광도기(Graphite furnace

Atomic Absorption Spectrometer, GF-AAS)를 사용한다.

5. 분석방법
5.1 소변 중 크롬

5.1.1 분석원리 및 시료채취

(1) 분석 원리

수용성 6가 크롬은 흡입, 눈과 피부 접촉에 의해 3가 크롬(유입량 중 0.2 ～ 3 %

흡수)이나 4가 크롬(유입량 중 1 ～ 10 % 흡수)에 비해 빠르게 체내에 흡수되며,

체내로 흡수된 6가 크롬은 쉽게 세포막을 통과하며, 효소에 의해 모두 3가 크롬으

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로 환원된다. 수용성 6가 크롬이 환원된 3가 크롬은 단백질과 결합되어 적혈구,

뼈, 신장 등에 분포하여 수년에 걸쳐 천천히 배출되기도 하나, 노출되는 동안과 노

출 후 수시간 내에 소변을 통해 빠르게 배출된다. 배출된 소변 중 크롬을 비불꽃

원자흡광광도기로 분석한다.

(2) 시료 채취

(가) 시료채취 시기

목요일이나 금요일 또는 4∼5일간 연속 작업 종료 2시간 전부터 직후에 채취

한다. 증감성을 확인하기 위해서는 당일 작업 시작 전과 작업 종료 2시간 전

부터 직후에 채취한다.

(나) 시료채취 요령

① 채취 용기는 밀봉이 가능한 용기를 사용하고, 시료는 10 mL 이상 채취한다.

② 채취한 시료 용기를 밀봉하고 채취 후 5일 이전에 분석하며 4

℃(2∼8 ℃)에서 보

관한다. 단, 분석까지 보관 기간이 5일 이상 걸리면 시료를 냉동보관용 저온

바이알에 옮겨 영하 20 ℃이하에서 보관한다.

5.1.2 비불꽃원자흡광광도법

(1) 기구 및 시약

(가) 기구

① 용량플라스크 100, 10 mL

② 마이크로시린지 10, 100

μL

③ 자동피펫 10-100, 200-1000

μ L

④ 시험관과 마개

⑤ 롤러 믹서

⑥ 볼텍스 믹서

(나) 시약

① 크롬 표준용액 1000 ppm(1000 μ g/mL)

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② 질산 특급 시약(검사 관련 중금속의 함량이 적은 것)

③ 인산암모늄((NH4)2HPO4)

④ 트리톤 X-100(Triton X-100)

⑤ 탈이온수(18 MΩ/cm 이상)

(2) 시약 조제

(가) 표준용액

① 100 mL 용량플라스크에 1 % 질산을 반쯤 넣고 크롬 표준용액(1000 μg/mL)

을 100 μ L 주입한 후 표선을 맞추어 표준용액 원액을 제조한다.

② 표준용액 원액을 각각 0.25, 0.5, 1, 1.5, 2 mL를 취하고 이를 10 mL 용량플라

스크에서 1 % 질산으로 희석하여 2.5, 5, 10, 15, 20 μ g/L의 검량선용 표준용

액을 만든다. 이 5가지 농도의 표준용액을 검량선용 표준용액으로 한다. 1 %

질산를 공시료(blank)로 한다.

(나) 희석액

① 100 mL 용량플라스크에 트리톤 X-100 10 mL를 넣고 탈이온수로 표선을 맞

추어 10 % Tr X-100 용액을 조제한다.

② 100 mL 용량플라스크에 인산암모늄 20 g을 넣고 탈이온수로 표선을 맞추어

20 % 인산암모늄 용액을 제조한다.

③ 100 mL 용량플라스크에 10 % 트리톤 X-100 1 mL와 20 % 인산암모늄 용액

1 mL, 질산 0.2 mL를 넣고 탈이온수로 표선을 맞추어 희석액을 제조한다.

(3) 시료 및 표준용액 전처리

(가) 모든 시료는 거품이 발생하지 않도록 40분간 롤러 믹서로 균질화시킨다.

(나) 산처리가 끝난 시험관에 <표 1>과 같이 시료를 순서대로 주입 후 볼텍스 믹

서로 30초간 혼합한다.

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<table>
<tr><th></th><th></th><th></th><th><표 1>표준물 첨가법에 의한 시료 및 표준용액 전처리 (단위 : mL)</th><th></th><th></th><th></th></tr>
<tr><td>순서</td><td>물 질</td><td></td><td>1 희석액 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 2 소변 - 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 3 탈이온수 0.1 - - - - - - 4 표준용액 - 0.1 0.1 0.1 0.1 - - 5 1 % 질산 0.1 - - - - 0.1 0.1</td><td>공시료 첨가1 첨가2 첨가3 첨가4 첨가0 시료</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td colspan="7">(4) 원자흡광광도기 분석 조건</td></tr>
<tr><td colspan="7">(가) 분석조건 예시</td></tr>
<tr><td colspan="7"><표 2> 분석 조건</td></tr>
<tr><td colspan="7">AA condition</td></tr>
<tr><td></td><td>Type</td><td></td><td></td><td>Furnace / Zeeman</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td>Instrument mode</td><td></td><td>Absorbance</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td>Calibration mode</td><td></td><td></td><td>Standard Additions</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td></td><td>Measurement mode</td><td>Peak Height</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td>Wavelength</td><td></td><td>357.9 nm</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td>Slit Width</td><td></td><td>0.5 nm</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td>Lamp Current</td><td></td><td>5.0 mA</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td></td><td>Background Correction</td><td>BC On</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td></td><td>Total vol./Sample vol.</td><td>20 ㎕</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td>Hot Inject</td><td></td><td>On</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td></td><td></td><td>Hot Inject Temp.</td><td>50 °C</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td colspan="7"><표 3> 온도 프로그램</td></tr>
<tr><td colspan="7">Flow</td></tr>
<tr><td>Step</td><td>Temp (°C)</td><td>Time (s)</td><td>(L/min)</td><td>Gas Type</td><td>Read</td><td>Signal</td></tr>
<tr><td>1</td><td>90</td><td>10</td><td>0.3</td><td>Normal</td><td>No</td><td>No</td></tr>
<tr><td>2</td><td>90</td><td>10</td><td>0.3</td><td>Normal</td><td>No</td><td>No</td></tr>
<tr><td>3</td><td>110</td><td>15</td><td>0.3</td><td>Normal</td><td>No</td><td>No</td></tr>
<tr><td>4</td><td>110</td><td>10</td><td>0.3</td><td>Normal</td><td>No</td><td>No</td></tr>
<tr><td>5</td><td>1100</td><td>15</td><td>0.3</td><td>Normal</td><td>No</td><td>No</td></tr>
<tr><td>6</td><td>1100</td><td>15</td><td>0.3</td><td>Normal</td><td>No</td><td>No</td></tr>
<tr><td>7</td><td>1100</td><td>2</td><td>0.3</td><td>Normal</td><td>No</td><td>Yes</td></tr>
<tr><td>8</td><td>2600</td><td>0.8</td><td>0</td><td>Normal</td><td>Yes</td><td>Yes</td></tr>
<tr><td>9</td><td>2600</td><td>2</td><td>0</td><td>Normal</td><td>Yes</td><td>Yes</td></tr>
<tr><td>10</td><td>2750</td><td>2</td><td>0.3</td><td>Normal</td><td>No</td><td>Yes</td></tr>
<tr><td>11</td><td>2750</td><td>5</td><td>0.3</td><td>Normal</td><td>No</td><td>No</td></tr>
</table>

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(5) 농도 계산

검량선용 표준용액의 농도를 가로(x)축으로 하고, 크롬 피크 면적을 세로(y)축으

로 하여 검량선을 작성하고, y= ax+b의 회귀방정식을 통해 크롬의 농도(μg/L)를

구한다. 크롬의 농도값을 크레아티닌으로 보정하여(μg/g 크레아티닌) 크롬의 생

물학적 노출평가 결과값을 계산한다.

(6) 생물학적 노출 평가 기준

(가) 기준값 : 30 μ g/g 크레아티닌

(7) 정밀도

예) 5, 10, 20 μg/L 농도 수준에서 변이계수 2.9 %

(8) 정확도

예) 10, 20 μ g/L 농도 수준에서 회수율 각각 99.6 %, 93.1 %

(9) 검출 한계

(가) 검출한계

예) 0.15 μ g/L(S/N 비 3)

(나) 산출방법

LOD = 3 ☓ SD

(LOD : 검출한계,

SD : 표준편차)

미첨가 소변을 6회 반복 측정하여 검출된 반응값의 표준편차의 3배를 검출한계로

한다.
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